透射電鏡是一種高分辨率、高放大倍數(shù)的顯微鏡,是材料科學(xué)研究的重要手段,能提供極微細(xì)材料的組織結(jié)構(gòu)、晶體結(jié)構(gòu)和化學(xué)成分等方面的信息。透射電鏡的分辨率為0.1~0.2nm,放大倍數(shù)為幾萬(wàn)~幾十萬(wàn)倍。透射電鏡由電子光學(xué)系統(tǒng)、真空系統(tǒng)和電子學(xué)系統(tǒng)三大部分組成。
透射電鏡制樣流程:
組織取材(60s內(nèi)),體積<1mm3,之后進(jìn)行如下步驟:
1、前固定:3%戊二醛2h或過(guò)夜。
2、漂洗:磷酸緩沖液,3次,10min/次。
3、后固定:1%鋨酸固定液,2h。
4、漂洗:(同上)。
5、梯度脫水:50%丙酮,70%丙酮,80%丙酮,90%丙酮兩次,各
10min。100%丙酮兩次,各15min。
6、滲透:丙酮/包埋劑(1:1,1:2),室溫各1h。丙酮/包埋劑1:3,4度過(guò)夜。純包埋劑,4度過(guò)夜。
7、包埋:純包埋劑(37度,45度,60度各24h)。取出包埋塊,進(jìn)行超薄切片,片厚70nm。分別采用醋酸雙氧鈾對(duì)切片進(jìn)行染色30min,雙蒸水漂洗3-5次,之后用檸檬酸鉛染色10min,雙蒸水漂洗3-5次。待切片干燥后,透射電鏡觀察。
隨著科技的發(fā)展,人們對(duì)透射電鏡的使用要求越來(lái)越高,透射電鏡仍在不斷發(fā)展。